儀器介紹（shào）

實驗目的：

檢測受試物是否引（yǐn）起哺乳動物骨髓細胞染色體（tǐ）畸變,以評價受試物致突變的可能性

實驗概述：

染色體（tǐ）是細胞（bāo）核中（zhōng）具有特（tè）殊結構和遺傳功能的小體,當化學物質（zhì）作用於（yú）細胞周期G1期和S期時誘發染色體型畸變,而作用於（yú）G2期時則誘發染色單體型畸變（biàn）。給試驗（yàn）的大、小鼠腹腔注入秋水仙素抑製細胞（bāo）分裂時紡錘絲的形成,以增加（jiā）中期分裂相細胞的比（bǐ）例,並使染色體絲（sī）縮短、分散、輪廓清晰。在（zài）顯微鏡下觀察染色體數目（mù）和形（xíng）態。本方法特別適用於（yú）需考慮體內（nèi）代謝活化後的染色（sè）體畸（jī）變分析。若有證據表明受試物或其代謝（xiè）產物不能到達骨髓,則不適（shì）用於本方法，

應用範圍

應用於科（kē）研（yán）、農業、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個領（lǐng）域

符合標準：

GB/T 15670.16-2017《農藥登記毒理學試驗方法第16部分:體內哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗》

二、試驗（yàn）流程

1）動（dòng）物選擇:常用齧（niè）齒類動物（wù）（大鼠或小鼠），通常每組至少5隻/性別。

2）給藥方案:

單次給藥:通（tōng）常在采樣前12-48小時給藥（覆蓋（gài）細胞周期）

多次給藥:若受試物代謝或毒性需重複暴露。

3.陽性對（duì）照:已知（zhī）致（zhì）畸變劑（如環（huán）磷酰胺）

4.陰性對照:溶劑對照（如生理鹽（yán）水或DMSO）

5.采樣（yàng）時間:通常在給藥後24小時和48小時采集（jí）骨髓細（xì）胞（bāo）（覆蓋不同細胞周期（qī）階段）

6.染色體製備:

處死動（dòng）物後取出骨髓細胞。

用秋水仙素（sù）（Colchicine）處理，阻斷細胞（bāo）分裂於中期。低滲處理、固定（dìng）、製（zhì）片並染色（如Giemsa染色）

7.鏡檢（jiǎn）分析:

觀察至少200個中（zhōng）期分裂相/動物，記錄畸變類型（xíng）和頻率，

區分染色體（tǐ）型畸變（如雙著絲粒體）和染色單體型畸變（biàn）（如斷（duàn）裂）

三、結果判定

1）劑量相關性:畸變率隨（suí）劑量增加而升高。

2）統計學差異:試驗組畸變率顯著高於陰性對照組(如p<0.05)

3）生物學意義:需結合曆史對照數據和畸變類型綜合評估。